Como harías para detectar las alteraciones genética de la bacteria escheríchia coli?

PRUEBA DE FLUCTUACIÓN (LURIA Y DELBRÜCK, 1943)

En bacterias se puede estudiar con facilidad las mutaciones que confieren resistencia a agentes externos específicos que normalmente no son tolerados.

El fago T1 infecta y mata a la mayoría de las células de E.

Coli, por lo tanto, si se siembra una placa con un gran número de bacterias y fagos, la mayoría de estas morirán y las pocas que sobrevivan representarán colonias resistentes que pueden ser aisladas.

Luria y Delbrück pensaron que si la causa de la resistencia a T1 era un suceso de mutación poco frecuente, tal suceso podría producirse pronto o tarde durante el crecimiento del cultivo bacteriano, ya que la mutación es un fenómeno aleatorio a lo largo del tiempo.

Si se produce pronto, el cultivo daría lugar a una gran cantidad de células resistentes ; ahora bien, si se produce tarde, originaría muy pocas células o bacterias resistentes.

PLACA REPLICADA (LEDERBERG Y LEDERBERG 1952

A diferencia de Luria y Delbrück, el matrimonio Lederberg y Lederberg, en 1952, decidió plantearse la posibilidad de demostrar la existencia de mutaciones previas resistentes en una población antes de que fuese introducido el agente ambiental.

Sembraron en una placa (Placa Matriz) una población de bacterias que no habían estado en contacto con el fago T1.

Mediante un tampón o muñequilla con una pieza de terciopelo estéril de la forma de la placa se saca una copia de las colonias de la Placa Matriz poniendo en contacto la pieza de terciopelo con la Placa Matriz y posteriormente se aplica el terciopelo a tres placas nuevas (Placas replicadas) que contienen el agente selectivo (fago T1).