· Método del Biuret
En solución alcalina el Cu + 2 reacciona con el enlace peptídico de las
proteínas dando un color purpúreo que se cuantifica
espectrofotométricamente (540nm).
Como estándar se utiliza una solución
de albúmina.
Proteína + Cu + 2 Complejo Cu - Proteína (púrpura)
Muestra : suero o plasma (heparina o EDTA).
Separar el suero del coágulo o
el plasma de las células antes de 3h.
Si el paciente está acostado durante la
extracción el resultado será menor.
· Método de Lowry
Dependen de la concentración de tirosina y triptófano de la muestra.
Consiste en dos reacciones :
1.
Reacción de Biuret
2
2.
Reacción de Folin : característica de los grupos –OH reductores de los
aminoácidos tirosina y triptófano que, junto con los complejos Cu + 2
,
reducen el reactivo de Folin generando un color azul.
Está sujeto a muchas interferencias.
Se utiliza fundamentalmente en orina.
· Turbidimetría
Medición de la turbidez resultante de la precipitación de proteínas
· Absorción en el ultravioleta
Se mide la absorbancia a 270nm originada fundamentalmente por los
anillos aromáticos de triptófano y tirosina.
· Métodos de unión a colorantes
Nota
para semicuantificar la concentración de proteínas en orina se
utilizan tiras reactivas.