En que consiste la prueba de western blot?

Western blotResultado del Western blot : una membrana con las proteínas separadas en la electroforesis unidas, de las que sólo se disciernen aquellas contra las se ha añadido un anticuerpo.

ElWestern blot, inmunobloto electrotransferencia , es una técnica analítica usada para detectarproteínasespecíficas en una muestra determinada (una mezcla compleja de proteínas, como un extracto tisular).

Mediante unaelectroforesis en gelse separan las proteínas atendiendo al criterio que se desee : peso molecular, estructura, hidrofobicidad, etc.

Hay casi tantas posibilidades comotiposde electroforesis existen.

Luego son transferidas a unamembrana adsorbente(típicamente denitrocelulosao dePVDF) para poder buscar la proteína de interés conanticuerposespecíficos contra ella.

12Finalmente, se detecta launión antígeno - anticuerpoporactividad enzimáticaofluorescencia, entre otros métodos.

De esta misma forma se puede estudiar la presencia de la proteína en el extracto y analizar su cantidad relativa respecto a las otras proteínas.

Esta técnica es hoy en día imprescindible en varios campos de labiología, como labiología molecular, labioquímica, labiotecnologíao lainmunología.

Existe toda una industria especializada en la venta de anticuerpos (monoclonalesypoliclonales) contra decenas de miles de proteínas diferentes.

34El Western blot fue desarrollado en el laboratorio deGeorge Stark, en laUniversidad de Stanford.

2El nombre (Western, occidental en inglés) le fue dado porW.

Neal Burnette, 5y consiste en un juego de palabras con una técnica análoga pero que usa DNA, elSouthern (sureño) blot, que en este caso debe su nombre a su descubridor, Edwin Southern.

Otras técnicas que fueron nombradas siguiendo este criterio son elNorthern blot(en el que se separa e identifica RNA), elEastern blot, elSouthwestern blot.